一、操作規(guī)程: 1灌膠
a、取出灌膠模具,打開封底盤**完全開放的狀態(tài),松開兩側(cè)螺絲,向外側(cè)打開夾子。
b、取長方形和帶凹槽的長玻板各一塊,從內(nèi)到外依次按帶凹槽玻板及長方形玻板的順序排列,形成gel sandwich。注意正確排列以防漏膠。
c、短玻板朝外將sandwich放入模具中,檢測sandwich的底是否緊靠底面。旋緊螺絲。將封底盤鎖**密閉狀態(tài)。
d、將模具放在桌面上準(zhǔn)備灌膠。 e、根據(jù)需要配制一定濃度的膠。
2分離膠的灌制:用加樣槍慢慢將膠加入sandwich中,注意不要有氣泡。其上加0.1%SDS封頂.
3濃縮膠的灌制:待分離膠凝后棄去SDS,開始灌濃縮膠,**后輕輕插入梳子。
f、待膠聚合后,拔出梳子,用電泳緩沖液清洗加樣槽,去除未聚合的膠。 g、模具放入電泳槽中。 4電泳
a、加適量的電泳緩沖液 b、準(zhǔn)備樣品,加樣。
c、蓋上電泳槽的蓋子,注意紅色對正極,黑色對負(fù)極。打開電源,開始電泳。初始電壓100V, 15分鐘后改為120v。
d、直**指示劑距前沿1cm處結(jié)束電泳,拔掉電源,小心取出膠,根據(jù)需要進(jìn)行染色或轉(zhuǎn)膜,回收電泳緩沖液(可重復(fù)利用3次)。 二、注意事項(xiàng):
a、每次用完后,立即清洗電泳槽,灌膠模具,玻璃板(先用自來水洗干凈,再用蒸餾水沖一遍后放在架子上晾干)。
b、扣緊或打開灌膠模具時要用力均勻,以免壓壞玻璃板。 c、蓋上電泳槽的蓋子時,務(wù)必注意正負(fù)極不要接反。